PCR實驗室是分子診斷的基礎(chǔ)，也是進行PCR實驗的場所。實驗室的基本知識仍然是非常重要的一環(huán)。博泰小編帶大家了解PCR實驗室的原則與注意事項有哪些。

一、PCR實驗室工作基本原則

1.進入各工作區(qū)域應當嚴格按照單一方向進行。

試劑儲存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→ 擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

2.各工作區(qū)域必須有明確的標記，不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品不得混用。

3.不同的工作區(qū)域使用不同的工作服。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出。

4.實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。

5.工作結(jié)束后，必須立即對工作區(qū)進行清潔。工作區(qū)的實驗臺表面應當可耐受諸如次氯酸鈉的化學物質(zhì)的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。

6.實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序，所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》。

二、Pcr實驗室的注意事項

1、試劑儲存和準備區(qū)

貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經(jīng)過擴增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性對照品及質(zhì)控品不應當保存在該區(qū)，應當保存在標本處理區(qū)。  

2、標本制備區(qū)

由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，可通過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件，避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染，加入待測核酸后，必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在傳染危險性的材料，必須在生物安全柜內(nèi)開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。

3、擴增區(qū)

為避免氣溶膠所致的污染，應當盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。必須注意的是，所有經(jīng)過檢測的反應管不得在此區(qū)域打開。

4、擴增產(chǎn)物分析區(qū)

核酸擴增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法、Southern轉(zhuǎn)移、核酸測序方法、質(zhì)譜分析等。